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細胞/組織裂解液
細胞/組織裂解液
詳情說明 / Details

細胞/組織裂解液

規格120ml      價格1:¥320

規格250ml      價格2:¥680

規格3100ml    價格3:¥1320

 

SKU: RC0005Category: 細胞裂解液Tags: Cell Culture

產品概述

從細胞或組織中提取到完整的蛋白質樣品是影響免疫印跡分析(Western blotting,WB)得到真實可靠結果的關鍵因素之一。在實際操作中,從細胞膜、細胞質、細胞器及細胞核中提取蛋白質通常采用去污劑緩沖液(如 RIPA 緩沖液)和/或物理破碎(如超聲處理)的方法;尤其是含有 0.1% SDS 的RIPA 緩沖液或其替代品(如不含 SDS 的 NP-40 緩沖液)已作為一種標準方法被廣泛用于哺乳動物細胞和組織的裂解。事實上,RIPA 可以有效溶解和提取分子量小于 90 kDa 的中、小分子的絕大部分的蛋白質,但其對于分子量大于 90 kDa 的大分子蛋白質功效不大。為了更有效地提取到大分子蛋白,許多實驗室會將 RIPA 緩沖液和超聲處理結合使用,通過超聲打斷 DNA,從而降低裂解液的粘稠度。然而,超聲處理會破壞大分子蛋白。此外,為了保證蛋白質在提取的過程中不被細胞本身的蛋白酶降解和蛋白酶去修飾,各種蛋白酶抑制劑和特異的酶抑制劑要加到RIPA 緩沖液中。例如,為了減少蛋白質的降解,需要將蛋白酶抑制劑如 PMSF 添加到 RIPA 緩沖液中;同樣,為了抑制磷酸酶活性,需加入氟化鈉和正釩酸鈉。即便如此,翻譯后修飾的蛋白信號還是不能得到有效的保護。

本試劑盒產品解決了以上問題和缺陷。它可以快速完整的提取細胞和組織中蛋白質,并有效保護蛋白質的化學修飾,可以取代現有的 RIPA 及其衍生的緩沖液,具有通用性好、應用廣泛、實用高效等優點,同時,該裂解試劑盒在提取蛋白質時無需額外添加蛋白酶、 磷酸酶以及其它酶抑制劑,無需超聲波處理,不僅可以完整提取分子量大于 90kDa 的大分子蛋白質, 而且對小于 90kDa 的蛋白質分子應用同樣有效,大大簡化了實驗流程,節約時間和材料成本,從而在源頭上為下游的蛋白質分析提供了優質完整的蛋白質樣品。

 

產品組分

規格

組分A

組分B

RC0005-S

40 μL

20 mL

RC0005-M

100 μL

50 mL

RC0005-L

200 μL  

100 mL

 

產品特性

1.無需添加蛋白酶或其他酶抑制劑或超聲處理。

2.只需混合試劑 A 和 B;提取過程僅需 15 分鐘。

3.接近完整地抽提大分子蛋白質;無超聲處理,避免蛋白質片段化。

4.保護蛋白質翻譯后修飾(如磷酸化、糖基化、泛素化、甲基化和乙酰化)無損失。

5.適用于哺乳動物細胞和組織的提取。


產品儲存

試劑 A 存放于-20°C 冷凍條件,試劑 B 存放于室溫或 4°C 冷藏條件。

注:若試劑 B 在 4°C 下長時間保存,可能會出現沉淀,這不影響產品質量。當移至室溫下,沉淀會重新溶解。


產品應用

變性蛋白的提取;免疫印跡分析

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